摘要 以牛大力鲜品为原料，以提取温度、料液比、电机频率和提取时间等因素设计单因素试验并且设计正交试验进行闪式提取牛大力多糖的工艺研究。根据结果得出：粗碎后的牛大力鲜品在温度25 ℃、料液比1∶30、电机频率40 Hz、提取时间8 min的条件下，牛大力多糖提取量达到31.3 mg/g，闪式提取提取牛大力多糖具有快速、高效、节能的特点。

  牛大力为豆科植物美丽崖豆藤（Millettia speciosa Cha-mp.），以根入药，素有南方高丽参之称，为两广地区著名的药食两用植物，其主要化学成分为牛大力多糖，具有补肺滋肾、清热止咳、舒筋活络、提高免疫力、抗炎、抗氧化和清除自由基及抗疲劳的作用，主治肺虚咳嗽、咳血、肾虚、腰膝酸痛、遗精、白带、风湿痹痛、跌打损伤、慢性肝炎等，同时毒副作用小，性质稳定，不易变性失活，是理想的免疫增强剂。

  近年来，中药多糖的提取工艺有了很大的提高，使用了一些先进的技术，如超临界、酶法、超声提取法、微波法、半仿生提取法等。鉴于规模化生产设备跟不上、成本高等因素，目前多糖的提取方法常采用传统的水煮醇沉法，但此法耗醇量大、工序时间长、浸膏易吸潮发霉等。本研究以牛大力鲜品为原料，采用闪式提取技术，研究了闪式提取法提取牛大力多糖的生产的基本工艺，旨在为规模化生产提取牛大力多糖，提高提取量、降低提取成本提供参考。

  1.1.1 原料。牛大力鲜品（三年生），采自桂林亦元生现代生物技术有限公司牛大力生产基地。

  1.1.2 主要仪器设施。AB-88型立式切片机（瑞安市飞腾制药机械厂）、WK-40型粗碎机（江阴市江腾机械有限公司）、JHBE-50A型闪式提取器（郑州赛克斯玻璃仪器有限公司）、UV1901型紫外可见分光光度计（上海棱光技术有限公司）、RE-6000A型旋转蒸发器（上海仪分科学仪器有限公司）、电子天平、分析天平、手持折光度仪。

  1.1.3 主要试剂。苯酚、浓硫酸和葡萄糖，均为天津大茂化学试剂厂生产，纯度为分析纯；去离子水。

  1.2.1 提取工艺。详细的细节内容为：①工艺流程。牛大力鲜品洗净切片粉碎闪式提取器提取3次 合并提取液浓缩牛大力多糖提取浸膏[1-2]。②操作要点。原料处理：取新鲜采挖的牛大力，用清水清理洗涤干净并去粗皮，放于阴凉通风处平铺摆放8～16 h使表面水分初步晾干。切片：取洗净后的牛大力用立式切片机切制成1～3 mm厚的薄片，密封低温保存待用。粉碎：取牛大力切片用粗碎机粉碎，过40目筛网得到牛大力粗碎粉，密封低温保存待用。提取：将牛大力粉放入闪式提取器中，以不同提取温度、不同的料液比、不同的电机频率、不同提取时间分别设计单因素试验。浓缩：将牛大力提取液放入到旋转蒸发器中浓缩至溶液浓度为30%时制得牛大力多糖提取浸膏。

  1.2.2 工艺优化试验。工艺优化的详细的细节内容为：①提取条件单因素试验。采用闪式提取法，以不同提取温度、不同料液比、不同电机频率和不同提取时间分别设计单因素试验。②提取工艺优化试验。称取粗碎、过40目筛的鲜牛大力粉9份，每份300.00 g，加入一定量的去离子水，选择温度、料液比、电机频率和提取时间为考察因素，每个因素设置3个水平，以总多糖提取量为评价指标，获得最佳提取工艺参数。

  1.2.3 分析测试方法。详细的细节内容为：①标准曲线的绘制。精确称取葡萄糖10.00 mg，溶解后定容至250 mL作为标准液。分别吸取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8 mL标准液，再分别用蒸馏水补足至2 mL。再加入6%苯酚溶液1.0 mL和浓硫酸5.0 mL，静置10 min，摇匀，室温下静置20 min，再在490 nm波长处测量吸光度[3-4]。以浓度为横坐标、吸光度为纵坐标绘制标准曲线）。②牛大力多糖提取量测定。将牛大力多糖提取液或提取浸膏稀释至一定倍数后取2.0 mL待测样品液按照上述方法测定吸光度值，代入标准曲线线性回归方程计算得多糖浓度进而通过牛大力多糖提取量公式计算牛大力多糖提取量：

  牛大力多糖提取量（mg/g）=多糖浓度（μg/mL）×2.0（mL）×稀释倍数÷称取牛大力粉的重量（g）÷1 000。

  称取20.00 g牛大力粉（粗粉），料液比为1∶20，电机频率为30 Hz，分别以25、35、45、55、65、75、85 ℃的条件闪提6 min，测定提取液的吸光度，求出牛大力多糖的提取量，结果如图1所示。

  由图1能够准确的看出，温度在35 ℃左右牛大力多糖提取量存在最大值，因此可选择温度为25、35、45 ℃作为正交试验的3个水平。

  称取20.00 g牛大力粉（粗粉），在温度为35 ℃，电机频率为30 Hz的条件下，分别以1∶10、1∶20、1∶30、1∶40、1∶50、1∶60的料液比闪提6 min，将闪提液浓缩到一样体积，测定提取液的吸光度，求出牛大力多糖的提取量，结果如图2所示。

  由图2能够准确的看出，随着液料比的增加，牛大力多糖提取量有由上升到下降的转折趋势，料液比在1∶30时牛大力多糖提取量存在最大值，因此可选料液比为1∶20、1∶30、1∶40作为正交试验的3个水平。

  称取20.00 g牛大力粉（粗粉），在温度为35 ℃、料液比1∶20的条件下，分别以10、20、30、40、50 Hz的电机频率闪提6 min，测定提取液的吸光度，求出牛大力多糖的提取量，结果如图3所示。